1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
彩色马蹄莲(Zantedeschiaspp.)是天南星科马蹄莲属多年生草本植物,是优良的高档切花植物,色彩艳丽、形态高雅、用途广泛,是切花中的佼佼者。
近几年,彩色马蹄莲在国际花卉市场上占有越来越重要的地位,被公认为21世纪的花卉之星。
[1]彩色马蹄莲进入中国时间不长,市场上的切花主要来自新西兰与荷兰,价格昂贵,但仍很受欢迎。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：对rsmA基因进行定向敲除，并对得到的突变株进行致病相关的表型测定，通过相关生物学和致病性测定探索rsmA基因与Pcc致病性的关系。
研究内容：获得胡萝卜软腐果胶杆菌rsmA基因的缺失突变株、互补菌株以及过表达菌株，完成野生株、突变株、互补菌株以及过表达菌株，完成游动性、沉降性、生物膜测定和碳青霉烯抗生素测定等生物学特性测定、白菜叶柄致病性测定以及果胶酶、蛋白酶、纤维素酶等致病因子测定。
拟解决的关键问题：1、构建rsmA突变体，获得突变株。
3. 研究的方法与方案
研究方法：通过同源重组基因敲除技术构建胡萝卜软腐果胶杆菌rsmA基因的缺失突变株、互补菌株以及过表达菌株，完成野生株、突变株、互补菌株以及过表达菌株的致病性、相关生物学特性和致病因子的测定和分析，通过以上分析测定探究胡萝卜软腐果胶杆菌rsmA基因致病相关功能。
技术路线：同源重组基因敲除技术路线实验方案：1缺失突变体、互补菌株及其过表达菌株的构建 按照Josenhans等介绍的方法，构建rsmA缺失突变株。
用基因片段0521的引物0521-1F和0521-2R、0521-2F和0521-2R以Pcc基因组DNA为模板进行PCR扩增，分别得到rsmA基因的上、下游片段 0521-1和0521-2，用 BamhⅠ和EcoRⅠ、XbaⅠ和HindⅢ进行双酶切; 用引物kan-F和kan-R以 PET30a质粒为模板进行扩增，得到的kan基因片段经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切。
4. 研究创新点
本项目的总体设计思路具有较强的新颖性,采用的技术手段较为先进。
根据同源重组的原理通过基因敲除技术获得rsmA基因的缺失突变体、互补菌株和过表达菌株，完成野生株、突变株、互补菌株以及过表达菌株，完成游动性、沉降性、生物膜测定和碳青霉烯抗生素测定等生物学特性测定、白菜叶柄致病性测定以及果胶酶、蛋白酶、纤维素酶等致病因子测定。
5. 研究计划与进展
（1）2016年9月-2016年10月查阅相关文献资料，了解并学习本实验相关基础理论知识和实验操作，确定实验方案（2）2016年10月-2016年11月通过基因敲除技术获得rsmA基因突变体，获得突变菌株（3）2016年11月-2017年1月完成相关生物学特性、相关致病因子和致病性测定（4）2017年2月-2017年3月完善实验细节，整理实验数据，撰写、修改并完成论文初稿（5）2017年4月提交论文，参加答辩
以上是毕业论文开题报告，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
