1. 研究目的与意义
内容：建立符合中医肝阴虚客观表征出血症的体外生物效应评价体系，采用CCl4诱导的大鼠肝上皮细胞衰老模型，验证二至丸补益肝肾体外作用，通过倒置光学显微镜观察细胞形态，β-半乳糖苷酶检测衰老模型的建立成功与否，指导后续实验研究。
意义：作为清上补下第一方，二至丸是中医临床肝肾同治的重要代表。但二至丸如何作用于肝肾两脏、调控肝肾代谢，使肝肾两脏互相联系、相互促进实现肝肾同治的作用机制和物质基础尚不十分清楚，严重制约其临床的合理有效应用。关注二至丸实现肝肾同治的作用机制及效应物质基础的研究，有利于揭示中医肝肾同源理论的科学内涵，有利于指导中医临床的合理用药。
2. 文献综述
肝脏细胞衰老代谢组学研究进展
1.代谢组学简介：
1.1概念：
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3. 设计方案和技术路线
1.细胞培养
复苏：将肝细胞株冻存管从-80℃超低温冰箱中取出，立即放入37℃水浴锅，持续摇晃约一分钟，迅速转移到10ml含有5倍体积含10％FBS的DMEM培养基(已提前于37℃预温)离心管中，颠倒混匀，离心(1000 rpm，5min)，弃上清，将沉淀细胞用2ml含10％FBS的DMEM培养基重新悬浮，转移至培养瓶中，加入5ml10％FBS的DMEM培养基，置于37℃，5%CO2培养箱中培养，24h换液，连续两天，待细胞长满。
2.造模：
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4. 工作计划
2.19-3.4 查阅并整理文献资料
3.4-5.31 进行课题实验
6.1-6.7 完成毕业论文设
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5. 难点与创新点
基于引发衰老的自由基理论，探究低浓度CCl4对BRL细胞的致衰老作用，并且以细胞代谢组学方法为二至丸补益肝肾药效作用寻找作用机理。
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