1. 研究目的与意义
内容:1.运用细胞培养技术,培养HepG2细胞;2.MTT法对纯化所得BA进行活性筛选;3.流式细胞仪观察BA诱导细胞凋亡作用;4.Western blot法观察STAT3通路蛋白的变化。
意义:癌症是一种严重威胁着人类身体健康的恶性疾病,发病率和致死率极高。
在世界范围内,癌症导致的死亡人数高居第二位,仅次于心脑血管疾病。
2. 文献综述
文献综述高悦馨1.STAT3的结构和功能信号转导和转录激活因子(STAT)是细胞内重要的信号传递和基因表达调控因子,具有传递胞浆信号和启动核内基因转录的双重功能,是JAK-STAT( janus activated ki-nase-signal transducer and activator of transcription)信号途径的重要环节。
此信号途径中JAK(Janus激酶)和STATs是细胞内和受体相结合的蛋白,完成从胞质到核内的信号转导[1]。
细胞表面受体与相应DNA启动子序列结合后,通过此途径将信号转导入细胞核并调控相关基因的表达[2]。
4. 工作计划
一、HepG2细胞培养2022.01-2022.02培养HepG2细胞并冻存备用。
二、MTT法活性筛选2022.03摸索确定适宜的BA给药浓度。
三、流式细胞仪观察细胞凋亡2022.04流式细胞仪观察BA诱导细胞凋亡作用四、Western blot法观察凋亡通路蛋白的变化2022.04-2022.05对BA抗肿瘤机制进行研究。
5. 难点与创新点
原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,外科手术或内科治疗效果差,病死率较高。
信号转导和转录活化因子3(STAT3)在肝癌中呈过度激活状态,STAT3的异常激活可促进肝癌细胞的增殖、血管生成、侵袭和转移,并抑制肝癌细胞的凋亡。
相关研究证实,抑制STAT3信号通路的活化或阻断上游细胞因子的信号转导可降低肝癌的致瘤性,因此,STAT3被作为肝细胞肝癌治疗的一个非常重要的分子靶向目标。
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