黄芩中潜在芳香烃受体的激动剂的筛选研究开题报告

 2023-01-03 15:19:45

1. 研究目的与意义

内容:1.黄芩提取物对AHR激动作用的研究2.半制备液相色谱分离成分,发现其AHR激动剂意义:研究黄芩中的黄酮类化合物的色谱行为,探究其对AHR的调节作用和机制,为治疗与AHR通路相关的疾病开辟新的方式,探求黄芩的新药理作用。

2. 文献综述

黄芩中潜在芳香烃受体的激动剂的筛选研究摘 要:芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,AHR)是芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,AHR)是一种配体激活性的转录因子。

没有与配体结合的芳香烃受体AHR在细胞质中以多聚体的形式存在,与配体结合以后,AHR会转移到细胞核内,随即与芳香烃受体的核转运蛋白(Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator,ARNT)结合,形成具有功能活性的转录因子复合物并参与多种疾病的发生。

近年来,研究发现黄酮类化合物是AHR的重要食源性配体,具有较高的活性,而黄芩中的主要成分黄芩素、黄芩苷、汉黄芩素、汉黄芩苷对AHR的激活作用的研究却很少。

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3. 设计方案和技术路线

1.黄芩的物质基础研究:半制备HPLC制备黄芩的分段馏出物1)采用水提、酸沉、水洗、再醇洗的方法进行提取和纯化黄芩苷、汉黄芩苷;利用自身酶水解法用乙醇加热回流提取黄芩素、汉黄芩素2)将所提取的粗品利用HPLC梯度洗脱方法进行初步纯化,将各段的馏分接受3)利用HPLC等度洗脱方法将2)所得分离产物进行精制,并与标准品进行比较 2.研究黄芩的有效成分对AHR的调节作用1)初步选定CYP1A为检验黄芩对AHR通路调节作用的指标2)对EL-4细胞给黄芩提取物、TCDD,利用Western Bolt法对CYP1A进行诱导,经过制胶、电泳、转膜、封闭、加一抗二抗、TBST洗涤、显色来观察不同浓度的黄芩提取液对CYP1A的调节作用3)7-乙氧基 - 试卤灵-O-脱乙基酶(7-ethoxy-resorufin-O-deethylase ,EROD)与CYP1A相关联,对EL-4给药,24小时后取出,加入荧光胺的乙腈溶液后使用试卤灵对其绘制标准曲线和进行酶量测定

4. 工作计划

2022年一月至三月查阅相关文献资料并完成开题报告2022年三月至五月进行课题实验2022六月完成毕业论文

5. 难点与创新点

首次将黄芩所含的黄酮类化合物语AHR相关联,并研究其调控作用与浓度的相关性。

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