1. 研究目的与意义
方格星虫（Sipunculus nudus）具有悠久的历史，被称为海洋冬虫夏草，不仅有丰富的营养价值，而且还具有潜在的药用价值。方格星虫具有清肺补虚、补肾养颜以及滋阴降火等功效，方格星虫的生物活性物质主要是多糖类、多肽类、蛋白质等，具有抗辐射、抗氧化、提高免疫力和抗疲劳等现代药理作用。本文主要研究的是方格星虫中的星虫激酶的分离纯化以及酶性质和酶活性。首先是星虫激酶的分离纯化，本实验中依据体外纤维平板活性跟踪依次采用硫酸铵沉淀粗提，疏水作用层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等多步精制的方法获得了方格星虫中的这一活性蛋白酶。其后分别采用电泳法和凝胶过滤色谱法对星虫激酶进行纯度鉴定，最后对星虫激酶进行分子量测定。然后从温度、pH、金属离子和抑制剂对星虫激酶活性的影响探究了星虫激酶的酶学性质。再次设计了一系列体外实验分别对星虫激酶对纤维蛋白作用，星虫激酶与纤维蛋白作用的量效关系以及星虫激酶对纤维蛋白原的作用机理进行探究。最后研究星虫激酶对大鼠动脉血栓形成的影响。通过对星虫激酶活性的研究，可以进一步扩大其应用范围，并且为以后的研究提供一定的理论基础。
2. 文献综述
方格星虫有效成分和药理活性的研究
张 静
摘 要：方格星虫（Sipunculus nudus）是一种无节、蠕虫状的海产体腔动物，有着重要的食用和药用价值，它含有多种生物活性，如多糖类、多肽类、氨基酸、星虫激酶、星虫活性蛋白和一些微量元素等等，具有调节免疫力、提高记忆力、抗疲劳、延缓衰老等药理作用。本文对方格星虫的生物活性成分和药理作用进行综述，为方格星虫资源的深入研究和开发提供借鉴。
3. 设计方案和技术路线
研究方案：
1、星虫激酶分离纯化：本实验中依据体外纤维平板活性跟踪依次采用硫酸铵沉淀粗提，疏水作用层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等多步精制的方法获得了方格星虫中的这一活性蛋白酶。其后分别采用电泳法和凝胶过滤色谱法对星虫激酶进行纯度鉴定，最后对星虫激酶进行分子量测定。
2、星虫激酶的酶学性质：从温度、pH、金属离子和抑制剂对星虫激酶活性的影响探究了星虫激酶的酶学性质。
4. 工作计划
2022年1月2022年2月 查阅文献，完成文献综述以及开题报告。
2022年3月2022年4月 完成星虫激酶的分离纯化以及其酶学性质的研究。
2022年4月2022年5月 完成星虫激酶对纤维蛋白及纤维蛋白原的作用的研究。
5. 难点与创新点
方格星虫（Sipunculus nudus）具有悠久的历史，被称为海洋冬虫夏草，不仅有丰富的营养价值，而且还具有潜在的药用价值。方格星虫具有清肺补虚、补肾养颜以及滋阴降火等功效，方格星虫的生物活性物质主要是多糖类、多肽类、蛋白质等，具有抗辐射、抗氧化、提高免疫力和抗疲劳等现代药理作用。对方格星虫的现代研究结果发现方格星虫水提物兼有直接纤溶活性和纤溶激酶活性，而且研究较少，本文旨在对该星虫激酶的酶学性质进行研究，并进一步对其体内外活性进行研究。
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