Aurora Kinase类抑制剂对上呼吸道 肿瘤细胞增殖抑制及药理学作用研究初步分析开题报告

 2022-12-30 09:55:20

1. 研究目的与意义

哺乳动物细胞有丝分裂是机体发育的基础,也是肿瘤细胞分裂增殖的重要且唯一途径。

研究细胞有丝分裂可划分为间期,前期,中期,后期和末期五个连续过程。

近年来有文献报道,调控细胞有丝分裂的蛋白激酶如cyclin-B,CDK1,PIks,Aurora,NIMA等出现过表达时,会出现非整数倍染色体或者四倍体,进而导致细胞增殖发生异常,诱发癌症。

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2. 文献综述

有关Aurora Kinase类抑制剂对上呼吸道肿瘤细胞增殖抑制及药理学作用研究初步分析的文献综述摘要: 本文旨在介绍细胞有丝分裂以及细胞周期调控在肿瘤治疗中的研究意义,分析以顺铂联合五氟尿嘧啶为主的基本临床药物治疗上呼吸道肿瘤,如口腔癌等的方案治疗效果以及生存期。

介绍目前靶点抑制剂治疗进展,以及其中Aurora A的目前投入临床使用的种类。

文章末尾介绍此文章的研究目的:近年来靶点抑制剂对肿瘤细胞的作用得到越来越多的认可,本课题研究选取一系列以Aurora A激酶为靶点的抑制剂,探讨其在舌鳞癌,鼻咽癌以及口腔癌等上呼吸道肿瘤细胞系内药物活性作用。

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3. 设计方案和技术路线

一、Aurora A质粒转染三种细胞系:Aurora A质粒采用lipo2000转染进三种上呼吸道肿瘤细胞系:Tca8113,LLN以及HB;分别获得对应的瞬转株和空白细胞株;72小时内进行下游检测;二、细胞增殖检测以及化合物对细胞的IC50检测:(1)CCK-8检测绘制三种典型上呼吸道肿瘤细胞系NC组以及质粒转染组后的0小时,24小时,48小时的细胞生长曲线;(2)选取MLN8237,Danusertib以及ENMD-2076三种化合物分别稀释8个药物浓度梯度,处理60-70%汇合度的三个空白细胞系24小时候,检测CCK-8孵育4小时后的OD450的读数,计算IC50。

选取不同细胞系最佳作用效果的Aurora A激酶抑制剂。

三、WB方案检测6株细胞的Aurora A表达水平2条Western blot条带结果:(1)Tca8113-NC,Tca8113-pld;LLN-NC,LLN-pld,HB-NC,HB-pld;(2)Tca8113-pld,Tca8113-pld-Inhibit,LLN-pld,LLN-pld-Inhibit,HB-pld,HB-pld-Inhibit;分析Aurora A激酶抑制剂对于不同细胞系转染质粒组之后干预蛋白表达最佳效果组。

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4. 工作计划

转染细胞系完成,着手进行IC50以及生长曲线绘制。

5. 难点与创新点

上呼吸道肿瘤,如口腔癌等基本临床药物还集中于顺铂联合五氟尿嘧啶的方案,近年来靶点抑制剂在肿瘤细胞的作用得到越来越多的认可,选取上呼吸道肿瘤细胞系研究新型Aurora A激酶抑制剂对此类肿瘤细胞的作用,是本文的主要创新点。

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