1. 研究目的与意义
呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)是导致婴幼儿急性下呼吸道感染的主要病毒病原，也是导致老年人超额死亡率升高的主要原因。目前尚无预防效果可靠的疫苗和药物。RSV感染已成为一种主要健康问题，目前临床常用的利巴韦林，易引起气道痉挛且无明显临床优势。而中草药对治疗RSV感染有独特优势，且安全性相对高于利巴韦林等化学药物。因此，寻找理想的抗RSV中药在临床使用中前景广阔。
金振口服液由羚羊角、平贝母、大黄、黄芩、牛黄、青礞石、生石膏、甘草八味药组成，具有抗菌、抗病毒、解热、镇咳、祛痰的功效，且不良反应少。用于小儿急性支气管炎符合痰热咳嗽者，具有良好的临床疗效。本课题将通过观察金振口服液体外抑制呼吸道合胞病毒作用；用酶联免疫吸附剂测定（ELISA）法检测细胞上清炎症因子白细胞介素一6(interleukin-6，IL-6)，肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor，TNF-α），白细胞介素-1β(interleukin一1β，IL-1β)的含量；蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB）检测细胞间黏附分子-1（intercellular cell adhesion molecule-1ICAM-1）的表达，三个实验探究金振口服液体外抗RSV的作用机制。为药物的临床应用提供科学依据。
2. 文献综述
气道炎症介导咳嗽反应的研究进展
邹琳琳（南京中医药大学14中药2班，041214260）
【摘要】咳嗽是机体重要的防御性反射，有助于清除呼吸道分泌物和有害因子，但反复剧烈的咳嗽会影响患者休息、生活，甚至引起气胸、支气管破裂、纵隔气肿等并发症。呼吸道感染后出现气道高反应性，咳嗽是临床常见的症状之一，目前咳嗽机制尚未完全明确，本文就咳嗽反应性增高研究进展进行综述。
3. 设计方案和技术路线
1.金振口服液体外抑制呼吸道合胞病毒作用
1.1Hep-2 细胞培养及病毒扩增
Hep-2细胞在10%小牛血清的DMEM培养基37℃，5%CO2条件下培养。待细胞长满单层后，RSV接种于Hep-2细胞中，继续在含2% CS的DMEM维持液中培养，逐日观察细胞病变，待病变融合达80%以上，反复冻融细胞离心收集上清液，于－70℃保存备用。
4. 工作计划
1.2-2.1：查阅整理文献资料，确定研究方案。
3.3-3.15：完成开题报告
3.16-5.31：完成相关课题实验和结果分析
5. 难点与创新点
1.本课题采用体外实验研究金振口服液抗RSV作用机制。体外实验相比体内实验利用整个生物体进行实验，可实现物种特异性，更简单，更方便和更详细的分析。
2.本实验在RSV感染 Hep-2 细胞用药物干预，观察细胞病变效应、检测细胞存活率和病毒滴度，判断药物对RSV感染的预防及治疗作用。
3.采用用酶联免疫吸附剂测定（ELISA）法和蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB）法检测细胞中的IL-6，TNF-α，IL-1β，ICAM-1。从炎症因子和细胞间黏附分子的含量变化探究药物的作用机制。
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