基于FoxO探讨当归芍药散抗成骨细胞过氧化损伤作用开题报告

 2022-12-27 11:29:46

1. 研究目的与意义

目前,全国骨质疏松患者日益增多,其中绝经后妇女患骨质疏松症高达40%。

绝经后骨质疏松是一种以低骨量和骨组织微结构破坏为特征的代谢性骨疾病,为I型骨质疏松,绝经后卵巢功能的衰退,雌激素分泌水平下降,导致破骨细胞的吸收大于成骨细胞的骨形成,骨稳态失衡,其结果是骨量减少,骨密度下降,最终导致骨痛、骨折。

FoxO属于FOX(叉头框蛋白)超家族中的"O"家族,由于FoxO转录因子中DNA结合结构域序列的不同,FoxO形成了FOX家族最多样化的亚家族。

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2. 文献综述

基于FoxO探讨当归芍药散抗成骨细胞过氧化损伤作用付裕摘 要:绝经后骨质疏松症(PMOP)是妇女在绝经后的高发病,又称为I型骨质疏松,其形成的主要原因是绝经后卵巢功能的衰退,雌激素分泌水平下降,从而导致破骨细胞的吸收大于成骨细胞的骨形成,二者之间的平衡水平被打破,其结果是骨量减少,骨密度下降,最终导致骨痛、骨折。

叉头框蛋白O( FoxO )家族中与骨质疏松密切相关的是FoxO3a,过表达FoxO3a能够通过激活MnSOD、过氧化氢酶等抗氧化酶调节氧化应激水平,防止氧化应激损伤细胞。

当归芍药散,本文主要是通过对成骨细胞的功能研究,基于FoxO的作用机理,探讨当归芍药散抗成骨细胞过氧化损伤作用。

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3. 设计方案和技术路线

方案:1.细胞培养:MC3T3-E1细胞用αMEM培养液培养,定期换液。

2.构建成骨细胞过氧化损伤模型:选用H2O2诱导MC3T3-E1细胞呈现过氧化损伤状态,再利用MTT法测定,选择当归芍药散最佳给药浓度与给药剂量。

3.细胞实验分组:分为6个组,分别为空白组、H2O2组、不同浓度的给药 H2O2组,利用流式细胞分析仪检测细胞凋亡率。

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4. 工作计划

第一阶段(2022.1):查阅文献,培养成骨细胞。

第二阶段(2022.2):建立合适的成骨细胞过氧化损伤模型。

第三阶段(2022.2~2022.3):实验预试,利用MTT法测定,选择当归芍药散最佳给药浓度与给药剂量。

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5. 难点与创新点

在临床上,从肝脾论治同样是中医临床治疗骨质疏松症的重要手段,以柔肝健脾见长的当归芍药散即为其中的代表方剂,但其现代药理学依据仍不清楚。

本研究基于FoxO/ROS途径探讨当归芍药散抗成骨细胞过氧化损伤的作用机制,为该治法提供现代实验依据,为骨质疏松的治疗提供新的思路。

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