1. 研究目的与意义
一、研究目的和意义:
肿瘤标志物(Tumor Marker)是反映肿瘤存在的化学类物质。它们或不存在于正常成人组织而仅见于胚胎组织,或在肿瘤组织中的含量大大超过在正常组织里的含量,它们的存在或量变可以提示肿瘤的性质,借以了解肿瘤的组织发生、细胞分化、细胞功能,以帮助肿瘤的诊断、分类、预后判断以及治疗指导。
二、研究内容:
2. 文献综述
磁微粒化学发光法用于CA199的含量测定
摘要:目的 建立检测癌症患者血清中抗原(CA199)的磁微粒化学发光法(CLIA)。待测CA199抗原同荧光素标记的抗体及酶标抗体结合形成三明治结构的复合物。通过抗荧光素抗体与荧光素的特异性结合使抗原抗体复合物连接在磁微粒上。在外加磁场的作用下进行磁微粒的富集,将免疫反应形成的复合物与未结合的他物质分离,加入类(金钢烷)-1,2-二氧乙烷及其衍生物的酶促发光底物。底物在酶作用下被催化裂解。形成不稳定的激发态中间体,当激发态中间体回到体回到基态时便发出光子,形成发光反应,通过光量子阅读系统记录光量子能量,并通过处理软件将光能量在标准曲线上转化为待测抗原的浓度。结果用磁微粒化学发光法检测肿瘤病患者血清中抗原阳性检出率为96.7%(116/120),检测试剂4℃可保存12个月。线性范围1.0~400U/mL,相关系数r≥0.9900。结论磁微粒化学发光法具有灵敏度高、特异性强、技术先进,试剂保存时间长等特点。
3. 设计方案和技术路线
1. 磁微粒的制备与磁微粒的抗体包被
2. 抗体偶联前的预处理
3. 抗体的荧光素标记和酶标记反应原理
4. 工作计划
1.通过查阅文献对磁微粒化学发光法有了一定的了解,并准备好实验所需要的材料。
2.根据设计的方案进行实验。
3.整理实验数据。
5. 难点与创新点
本实验采用双抗体夹心法灵敏度高、线性关系好、效率高、成本低。
能在最短时间内成本最小化去测量血清中抗原的含量,再进一步去诊断患者的病情。
其优势己被大量实验研究成果所证实。
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