1. 研究目的与意义
一、内容1.化学法评价灵芝多糖和丁香油体外抗氧化的活性体外化学实验评价抗氧化活性包括还原能力和清除自由基的能力。
皮肤代谢不断产生自由基，包括超氧阴离子、羟基自由基、单线态的氧等。
而还原能力也是反映其抗氧化性的一方面，还原能力越强其与自由基配对的能力越强，清除自由基的能力越强。
2. 文献综述
灵芝多糖和丁香油抗氧化活性的研究综述摘要：皮肤衰老机制有许多，目前研究最多是自由基学说，自由基在体内蓄积过多加速了细胞的衰老和损伤。
灵芝多糖和丁香油是两味中药，常运用于化妆品中，本文以灵芝多糖和丁香油的抗氧化活性和体外评价方法做综述，以期为往后在化妆品中的应用研究提供便利。
1自由基和皮肤衰老现代医学理论普遍认同的自由基学说认为人体产生的自由基必须适量才能保持机体健康，自由基在体内起到调节细胞信号转导、保护防御系统的作用[1]。
3. 设计方案和技术路线
1.化学法评价灵芝多糖和丁香油体外抗氧化的活性(1)铁氰化钾还原法测定还原能力试管中依次加入样品溶液2.5 mL、 铁氰化钾溶液(1.0%, w/v ) 2.5mL, 0.2 mol/L磷酸盐缓冲液（pH6.6) 2.5 mL，混合均匀。
将混合液在50℃水浴反应20 min，接着向混合液中加入2.5mL的三氯乙酸溶液(10%, w/v), 5000 r/min离心10 min后取5.0 mL上清液，再加入0.5 mL的三氯化铁溶液(0.1 %, w/v )在700 nm处测吸光度。
以BHT作为阳性对照。
4. 工作计划
2022年1月-2月邻二氮菲-铁氧化法测定羟基自由基的清除率2022年2月-3月NBT还原法测定超氧阴离子自由基的清除率2022年3月-4月测定DPPH自由基的清除率、铁氰化钾还原法测定还原能力2022年4月-5月灵芝多糖和丁香油对角质形成细胞存活率的影响2022年5月-6月灵芝多糖和丁香油对H2O2损伤的角质形成细胞存活率的影响以及灵芝多糖和丁香油复配对衰老的皮肤细胞的保护作用
5. 难点与创新点
考察丁香油对氧化损伤的HaCaT细胞是否具有保护作用。
探究灵芝多糖和丁香油的配伍的体外抗氧化的效果。
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