1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
奶牛乳腺炎主要指奶牛乳腺组织的各种炎症，其形成受到多方面因素的影响，如病原微生物、环境卫生、挤奶方式等，尽管有着多年的研究，其仍是奶牛饲养过程中花费成本最高的疾病之一,主要原因是引起该病的病原微生物在全国范围内广泛存在且发病率较高。此外，在奶牛乳腺炎的病例中隐形类型约占70%，这也为疾病的防控与治疗带来了一定的难度。而更为高效便捷的诊断方法则可能为疾病的整体防控带来转机。本文主要综述了奶牛乳腺炎的诊断技术。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标主要是为解决核酸扩增后依赖电泳设备，降低检测成本、节省检测时间。同时将PCR扩增与试纸条结合有利于结果的可视化，使之更加便捷、准确、及时。
主要内容是对金黄色葡萄球菌的nuc基因设计特异性引物，并在其上下游引物 的5′端分别修饰异硫氰酸荧光素（FITC）和地高辛（DIG）。同时在预制备的试纸条上喷涂异硫氰酸荧光素抗体和地高辛抗体，这样便可以在特异扩增的的核酸产物接触试纸条时产生可视性的颜色改变进而做到快速的诊断。
拟解决的关键问题是胶体金粒径大小的选择、PH的优化、标记抗体的标记量的优化、封闭液的优化以及后期试纸条稳定性、灵敏性和重复性的保证。
3. 研究的方法与方案
研究方法是对金黄色葡萄球菌的nuc基因设计特异性引物，并在其上下游引物 的5′端分别修饰异硫氰酸荧光素（FITC）和地高辛（DIG）。
同时在预制备的试纸条上喷涂异硫氰酸荧光素抗体和地高辛抗体，这样便可以在特异扩增的的核酸产物接触试纸条时产生可视性的颜色改变进而做到快速的诊断。
主要使用了PCR技术和胶体免疫金技术，当金黄色葡萄球菌的DNA与特意设计的上下游引物结合后，发生大量扩增，在这个过程中，结合在上下游的抗原也在不断的扩增，而试纸条上已结合的抗体可以同这些抗原发生特异性的结合并显色。
4. 研究创新点
特色之处在于结合了试纸条和PCR技术，摆脱了传统PCR技术对凝胶电泳的依赖，而联合抗原抗体结合的技术，使伴随特异扩增的致病菌DNA而扩增产生的抗原同试纸条上的抗体结合，使结果更加可视化和准确。
5. 研究计划与进展
在实验前期尽快的完成对胶体金粒径大小的优化、PH的优化、标记抗体的标记量的优化、封闭液的优化，制备出性质稳定、显色明显、灵敏度优秀的试纸条，预计于四月上旬完成，在四月中旬对试纸条进行持续的检测，保证其重复性与长期性。
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