1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
骨骼肌并非由单一肌纤维组成。每块肌肉含有不同收缩速度和力量的肌纤维：I型为慢缩型，II型为快缩型。慢缩纤维在受到刺激时约需110毫秒达到最大收缩状态，而快缩纤维仅需50毫秒。尽管“慢缩型”和“快缩型”仍然沿用，目前倾向于使用“I型肌纤维”和 “II型肌纤维”。I型肌纤维只有一种，II型肌纤维还可以分出许多亚型，主要有IIa、IIx、IIb三种。在小腿骨骼肌中,比目鱼肌（Soleus muscle，SOL）主要为I型肌纤维,其富含线粒体和氧化代谢酶,以有氧代谢为主要能量来源; 趾长伸肌（Extensor digitorum longus muscle，EDL）内富含II型肌纤维,线粒体含量少,主要以糖酵解的方式获取能量。
肌纤维具有几十到上百个细胞核，单根肌纤维的纤维类类型也不止一种，往往是杂合型的居多。这种杂合的肌纤维来源于不同细胞核的DNA转录表达，本实验拟通过单一肌纤维类型的肌细胞的鉴定为后续获得I型肌纤维卫星细胞的提供样品来源。
基于肌纤维形态上色泽，Loranzini 首次提出将骨骼 肌纤维分为“红肌”和“白肌”两种类型，并发现肌肉的色泽与运动能力有关。Ranvier 用电刺激方法将骨骼肌纤维分为“快肌”和“慢肌”两种类型。这种分类方法把形态和机能 的特点结合起来分类，相对较完善。1972 年David Costill 首次采用肌肉活检技术来研究肌纤维类型，这种研究方法一直沿用至今。无论是生物电技术还是肌肉活检都是基于形态机能的分类，存在人为色差判断的主观性，有一定局限性。但开创了新的研究方向即肌纤维分类研究。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：
本研究拟通过免疫荧光和单根肌纤维PCR分析肌纤维分型的多态性，为后续的I型和IIb型肌纤维卫星细胞的分离提供技术支持。
研究内容：
3. 研究的方法与方案
1、小鼠骨骼肌单根肌纤维分离
1）6周龄Balb/c小鼠断颈处死后，用75%究竟消毒小鼠体表，并用图钉固定四肢，将小鼠仰卧在解剖板上。剥去后腿皮肤，暴露肌肉。
2）轻轻取下覆盖于胫骨前肌（Tibialis anterior muscle，TA）的筋膜，切开远端TA肌腱，并用其剥离TA肌肉。小心地去除TA肌肉。
4. 研究创新点
本研究的创新之处在于建立了单细胞高通量RT-PCR的方法，通过单细胞裂解后，直接转反转获得cDNA。
5. 研究计划与进展
2019.10.15 - 2020.1.20 学习小鼠趾长伸肌和比目鱼肌单根肌纤维分离培养技术；
2020.2.20 - 2020.4.20 进行单根肌纤维分型多态性的免疫荧光和RT-PCR鉴定；
2020.4.21 - 2020.5.20 完成毕业论文的撰写。
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