2015-2019年我国猪繁殖与呼吸综合征病毒流行病学检测数据调查与分析开题报告

 2023-02-19 20:32:14

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome ,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一种急性接触性传染病,主要表现为母猪繁殖障碍、仔猪高死亡率和各年龄阶段猪只的呼吸道症状[1],PRRSV具有高度变异性、免疫抑制性和持续感染性,自发生以来给我国养猪业带来了巨大损失。

PRRSV属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属成员,病毒粒子呈球型,直径55nm~60nm,有囊膜,表面有纤突。病毒核衣壳呈二十面立体对称,其基因组为单股正链RNA,PRRSV基因全长约15kb,包含9个开放阅读框(ORF1a、ORF1b、ORF2a、ORF2b、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7),其中ORF5是病毒变异性最大的基因之一。ORF5编码的GP5蛋白,为主要的囊膜糖基化蛋白,能够诱导机体产生中和抗体和细胞凋亡,影响病毒的感染性和疫苗交叉保护率。Nsp2基因也具有高度可变性,其编码的Nsp2蛋白存在糜蛋白酶样半胱氨酸蛋白结构域,病毒感染后线性表位结合B细胞,刺激机体产生特异性抗体,因此具有较强的免疫原性。Nsp2蛋白影响病毒嗜性,如2006年前的毒株需要先适应原代巨噬细胞后才能适应Marc-145,且产生的细胞病变不明显。但2006年爆发的HP-PRRSV在Nsp2缺失30个氨基酸后可直接适应Marc-145且产生的细胞病变更加明显。ORF5和NSP2基因都具有高度变异性,因此常作为PRRSV基因分型和变异研究的重要依据[2]

PRRSV有两种基因型:PRRSV-1(欧洲型)和PRRSV-2(美洲型),两个基因型PRRSV基因组核苷酸同源性为50%~70%。Shi Mang 等人基于全球PRRSV ORF5序列的遗传演化分析,将PRRSV-1分为3个亚型,将PRRSV-2分为9个谱系(lineage)和37个亚谱系(sub-lineage)[3]。PRRSV于1987年在美国首次报道,随后欧洲和亚洲地区陆续报道本病。我国于1995年有关于PRRS的报道,随后郭宝清、杨汉春、姜平等学者先后分离确定了引起本次疫情流行的病原,代表性的分离株分别为CH-1a、BJ-4和J1,均为美洲型毒株[4]。随着我国疫苗的使用和综合防控措施的实施,PRRSV逐渐进入平稳期,猪群呈现抗体阳性但不排毒的稳定状态。2006年我国分离到PRRSV的变异株—高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV),其代表毒株JXA1和HUN4,此毒株的Nsp2蛋白存在30个不连续氨基酸缺失的特征[5]。HP-PRRSV以高热、急性死亡、高发病率、高死亡率以及妊娠母猪严重繁殖障碍为特征,给我国养猪业带来了巨大冲击。2013年之后类NADC30毒株开始增加,日益波及我国东北、东南、中东等十几个省份。目前通常认为类NADC30是从北美引进到中国的,但是与北美的NADC30株相比在其原有基础上又出现了新的变异。此毒株的NSP2蛋白存在131个不连续氨基酸缺失[6],感染该缺失模式的仔猪具有呼吸症状明显,发热程度更高、持续时间更长等临床特征[7]。类NADC30毒株具有较强的重组性,重组后经宿主筛选其增殖能力和免疫逃避能力可能更强。不同地区类NADC30毒株重组位置、重组基因片段和片段长度存在多样性,但重组的位置多位于非结构蛋白区和次要结构蛋白区[8]。通常由类NADC30株提供亲本,HP-PRRSV、VR2332为代表的经典毒株或疫苗毒株提供重组片段,重组毒株毒力差异较大,部分重组毒株经动物实验证明其毒力高于亲本NADC30株。Gao Z发现中国流行的PRRSV-2为Lineage1、Lineage3、Lineage5和Lineage8[9],毒株种类复杂加之PRRSV不断变异、重组及新毒株的出现,导致现有的商品化疫苗免疫效果不佳甚至免疫失败,给中国PRRSV的防控带来了困难[10]

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2. 研究的基本内容和问题

1、目标:2015-2019我国猪繁殖与呼吸综合征病毒流行病学检测数据调查与分析

2、内容:收集2015年来我国学者报道的PRRSV分子流行病学研究数据,先列表归纳,然后按照病毒样品的省份、年份、流行毒株类型和临床致病特性变化几方面进行分析比较,总结我国该病流行特点

3、拟解决的关键问题:数据统计与分析

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3. 研究的方法与方案

1.研究方法:

1.1收集文献:

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4. 研究创新点

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是我国养猪业中最棘手的问题之一,临床上主要表现为母猪流产、仔猪高死亡率和各年龄阶段猪的呼吸道症状,此外还能能够引起免疫抑制,继发多种病毒和细菌感染,使猪死亡率增加、生长缓慢、饲料成本增加、生长性能下降。我国于1996年首次由郭宝清报告本病,此后经历了3次大的疫情:1995-2004以表现母猪繁殖障碍的PRRSV为主;2005-2015年以“三高”(高发病率、高死亡率和高热)临床特征的高致病性PRRSV为主;2015至今以多种毒株并存,并且NADC30株流行日益波及我国东北、东南、中东等十几个省份,临床症状变化多样,带来巨大的损失和危害。免疫接种是防控PRRSV的主要手段,但近年来随着PRRSV弱毒活疫苗的广泛使用,一定程度上加速了PRRSV毒株的遗传变异和免疫逃避能力,给PRRSV的防控带来了更严峻的挑战。

目前,许多学者对各省份不同时间段PRRSV流行病学作了详细的调查和研究,包括采集病料检测样品阳性率、基因扩增、克隆、测序后进行生物信息学分析。也有学者报道了全国性的PRRSV流行病学调查结果,但主要为自1996年来的流行历史、类NADC30毒株的遗传演变规律等,内容详尽但不够全面。本文收集各省份2015年来的流行病学调查数据,根据毒株谱系、省份、年份进行分类和总结,再结合全国性流行病学调查结果进行补充,最后总结和分析我国2015~2019年PRRSV流行病学情况,为合理选择疫苗和PRRSV防控提供科学依据。

5. 研究计划与进展

3月份:收集文献

4月份:整理数据和分析结果

5月份:撰写论文

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