液相色谱-串联质谱法测定鱼油和猪肉中万古霉素残留开题报告

本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）：

1.本课题的意义：

万古霉素（Vancomycin）是一种糖肽类大分子抗生素，其性质如下：游离碱为无色结晶,等电点PH值为5；常用其盐酸盐,白色固体状,易溶于水；不耐高温,需要低温保存。其治疗作用有：抑制或杀灭葡萄球菌（包括耐青霉素和耐新青霉素株）、难辨梭状芽胞杆菌等，如心内膜炎、败血症、伪膜性肠炎。它是治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( MRSA) 感染的一线药物，虽然对厌氧菌和革兰氏阴性细菌无效，但是在其他抗生素对病菌无效时会被使用，从而常被作为超级细菌的最后一道防线。

根据现有研究显示，万古霉素的杀菌机理有：1.直接与细胞壁肽聚糖前体五肽侧链末端D-丙胺酰-D-丙氨酸结合，阻断肽聚糖多聚酶的转肽作用，影响细菌细胞壁肽聚糖前体的交叉联结，使细胞壁不能形成三维空间结构，从而发挥杀菌效果。2.万古霉素也能够起到损伤细菌细胞膜和抑制细菌RNA合成的作用。

万古霉素作为一种对抗超级细菌的抗生素，其能够治疗的适应症状有：1.对甲氧西林具有抗药性的葡萄球菌所引起的感染。2.对青霉素过敏患者及不能使用其它抗生素，包括青霉素、头孢菌素类。3.对其他抗菌素已经产生抗药性，而对万古霉素敏感的细菌引起的感染。4.单独使用可用来治疗链球菌，类白喉杆菌所引起的心内膜炎。5.可以与利福平，氨基糖甙类或两者一起并用，对由表皮葡萄球菌或类白喉杆菌引起的心内膜炎疗效颇佳。6.由于患者长期服用广谱抗生素从而诱导由难辨梭状杆菌引发伪膜性结肠炎。7.适用于患有先天性心脏病，风湿热或后天瓣膜性心脏病，并对青霉素过敏的患者。然而万古霉素的不良反应也很显著，它会产生：过敏反应，对血管有刺激性，有耳毒性、肾毒性等。其中肾毒性的发病率最高。

由上述材料可知，对于原本有失聪现象或正同时接受其他耳毒性药物治疗者深拥。对于肾功能不全者慎用。对于氨基糖甙类抗生素过敏者慎用。对于血压过高者慎用。

万古霉素的不良反应使其在人类的治疗中，使用慎重，然而在动物疾病的治疗中，万古霉素作为强而有效的抗生素被广泛使用，从而导致动物性食品中出现万古霉素。若是食用这类含有过量万古霉素的食物，则可能导致耐药株过早出现，导致在人类治疗疾病时，失去强有效的抗生素，出现无药可医的地步。

本研究主要通过定量测量动物性食品中万古霉素的含量来探究测量过程中各种实验条件对结果的影响，以方便检测人员可以直接使用该方法进行动物性食品中万古霉素的检测，从而加强食品安全，使得人们的食物能够安心食用。

2.国内外研究概况：

近十年来，关于万古霉素的研究主要基体为人类。关于万古霉素的适应症、不良

反应、药理作用等，以前的学者早就研究的十分相近。2009年，徐兵等人就万古霉素的高谷浓度给药方案进行了探讨和研究；2012年，刘丽萍等人对万古霉素的临床应用进行了分析。关于万古霉素含量的测定，从2009年就有人对其进行了研究，例如钱南评等人研究出了HPLC法测定万古霉素的血药浓度。

然而在食品研究方面，相较于人体的研究则少了很多，起步也晚了很多。2013年，有学者对于乳制品中万古霉素的测量方法进行了研究。其使用了三氯乙酸水溶液对乳制品进行了蛋白质的沉淀、万古霉素的提取，然后用阳离子固相萃取柱进行了净化。测量时用C18色谱柱分离，使用0.1%甲酸-乙腈作为流动相进行分析。该方法的回收率较可观，有72.5%~82.7%。说明该方法确实可行。2016年，有另外的学者对猪肉中万古霉素的定量测定进行了研究。其提取方法与乳制品不同，使用了0.1%甲酸-乙腈(85:15, V/V)溶液提取，正己烷脱脂，但是其净化和色谱分析方法与乳制品一致。关于猪肉中万古霉素的提取，上述方法也很实用，其万古霉素的回收率有75.3%~83.3%。

在大量的文献中，关于食品中万古霉素的研究较对人类疾病中万古霉素的研究较不受重视。所以，对于大量的食品来说，由于各类食物的性质不同，其万古霉素的测定方法也是大相径庭。本次研究从总结前人的经验，旨在对两种动物性食品中万古霉素的测定方法进行详细的研究，努力找出更加合适、有效的方法。

3.目的和意义：

万古霉素作为一种抗生素，也被广泛运用于动物的饲养中。然而泛滥的不符合规定的使用，导致动物性食品中出现了抗生素的残留。对于常见抗生素已经产生耐药性的病菌来说，万古霉素是其唯一有效的治疗药物，是治疗感染性疾病的最后一道防线。然而万古霉素的滥用，会使得耐药菌株过早的出现，从而在给人类做抗感染治疗时出现困难，极有可能出现无药可用的地步。

关于食品中万古霉素的测定，前人研究的较少，研究的基质也少，对于基数较大的动物性食品来说，测定的方法较不全面。本文主要准备探究猪肉、鱼油两种基质中万古霉素的检测方法，优化万古霉素的提取条件，用液质联用色谱技术对食品中万古霉素的残留进行定量分析。从而对前人的猪肉中万古霉素的测定方法进行优化，得出鱼油中万古霉素的测定方法，从而补充基质较大的动物性食品中，关于鱼油中万古霉素测定。方便后人对猪肉、鱼油2种基质中万古霉素的定量检测，加大食品安全的检查力度，使得人们的餐桌更加有保障。

4.参考文献：

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