1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）近年来，全国各地猪场发生腹泻疫情都比较严重，仔猪死亡率很高，包括一些管理及防疫做得较好的猪场也有发生。
有些猪场发病持续时间长达两个多月还没稳定下来，有些猪场就算稳定2~3周后，又有反复发病的情况，损失巨大。
尤其是在进入秋冬节，昼夜温差大，特别是初生和断奶仔猪容易在此季节出现腹泻症状。
2. 研究的基本内容和问题
课题研究内容： 猪病毒性腹泻分子流行性病学调查需要实现的目标： (1)分析三种病毒在不同阶段待检猪群中的感染率(2) 分析三种病毒在待检健康猪群中３种病原的感染率态 (3)分析三种病毒在猪群中的防治关键拟解决的关键问题：试剂与实验设备由江苏省检疫局兽医所老师提供
3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析本研究从2016年10月至12月以来对江苏省进行了样品采集，并利用RT-PCR方法检测，进行本次病毒性腹泻的流行病学调查实验方案：病料 调查样品主要为2016年10月2016年12月期间，来自江苏省份临床腹泻不同生长阶段猪的粪便试剂 核酸提取及扩增相关试剂：Trizol；反转录试剂盒、Taq DNA 聚合酶、10Taq Buffer、dNTPs、DL2000DNA、Marker与Loading Buffer。
BIOWEST等引物设计与合成 根据Gen bank登录的PEDV的M 基因序列（AY974335）、TGEV的N基因序列（DQ443743）和ARV 的VP7 基因序列（DQ786577）利用Primer Premier 5.0引物设计软件设计3对引物，配制为10μmol/L的浓度。
样品处理方法 粪样：取一定量的粪便加入250μL PBS，涡旋5min，然后反复冻融3次，以转速为12000r/min离心5min，取上清200μL备用；总RNA的提取 采用Trizol方法提取，具体步骤如下：取处理好的200μL样品上清液加入1mlTrizol试剂，于室温下静置5min，使核蛋白充分解离；加入０．２ｍＬ氯仿，充分剧烈振荡15s并于室温下静置2～3min；在C条件下，12000r/min离心15min离心后取上层液体500μL，加入等体积的异丙醇，轻轻混匀，室温静置10min，然后于4℃条件下，12000r/min离心10min后弃去上清；向沉淀中加入1ml75％乙醇（由无水乙醇与DEPC水配制），轻轻混匀，室温下静止5min后于4℃条件下，7600r/min离心5min后弃上清，管底沉淀即为总ＲＮＡ；将ＲＮＡ 样品晾干（不要彻底干燥），加入20μL DEPC水溶解（可于55～60℃促溶10min），即得到样品总RNA 模板。
4. 研究创新点
通过本次调研来给周边猪场的防疫计划进行参考，并且分析三种病毒防治的关键，是本次实验的创新，由于全国各地猪场发生腹泻疫情的严重性，不同年份流行性病学的变化，我认为对于猪病毒性腹泻分子流行性病学调查是经久不衰的，根据流行性病学调查进一步研究病毒基因流行变异特点、传染流行特点、和流行现状，可以更好地为猪流行性腹泻病的防控提供参考。
5. 研究计划与进展
进一步内容，收集资料 （15篇文章以上） 收集资料，制定总体方案，并与指导教师讨论 讨论实验流程的合理性进行实验数据分析写分析报告准备答辩
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