1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
为了保证基因组的完整性,细胞演化出了一定的监视程序来保证DNA的复制和染色体的准确分离。
有丝分裂分为细胞生长期(G1期),DNA复制期(S期),G2期和分裂期(M期)。
细胞周期检查点是一些控制细胞周期转换的时间顺序的信号传导通路。
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2. 研究的基本内容和问题
本实验研究目标是研究Chk2在小鼠卵母细胞成熟和胚胎早期发育中在细胞内的定位和功能。
3. 研究的方法与方案
本实验通过抑制剂抑制和免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜检测的方法来进行研究。
实验方案:(1) 通过FISH技术获得Chk2在减数分裂各时期的定位图(2) 使用抑制剂处理后,统计:Ⅰ统计GVBD 率:分别观察1h-3h对照组和试验组的GVBD个数Ⅱ统计极体排出率:分别观察8h-12h对照组和实验组的排极体的个数Ⅲ培养12h后观察Chk2蛋白在各个时期是否表达,及MII期的纺锤体的表型和染色体的排列(3) 统计纺锤体的异常率:培养3h后,加抑制剂,8h后观察纺锤体的表型和染色体的排列,同时检测MAPK和γ-tubulin的定位来辅助证明纺锤体是否正常。
4. 研究创新点
本实验通过FISH技术和激光共聚焦显微镜来对Chk2蛋白进行胞内的定位。
5. 研究计划与进展
本研究计划于2013年10月完成定位图,11月至2014年1月完成实验。
然后于2月-5月进行论文的撰写与修改。
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