1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
一、本课题的意义
热应激给动物养殖业带来了很大的损失,动物暴露在高温环境下会发生热应激,导致热休克。热休克蛋白能够在热应激环境中保护细胞避免产生损伤。热休克转录因子(HSF)能够调节热休克蛋白的表达,不同的HSF之间具有协同作用。Hsp90是热休克蛋白家族中的重要成员,能够保护心肌免受热应激的损伤。本课题针对阿司匹林对HSF的调节作用从而诱导Hsp90表达对热应激细胞凋亡的影响,对该机制进行研究,对临床热应激预防性用药提供试验参考。
二、国内外研究概况
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2. 研究的基本内容和问题
四、研究的目标
通过研究阿司匹林对HSFs的调节及其对Hsp90表达的诱导作用,观察阿司匹林在热应激过程中对鸡心肌细胞凋亡的影响并初步探究其作用机制,观察HSF与Hsp90表达、Hsp90表达与细胞凋亡比率之间的关系。
五、研究的内容
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3. 研究的方法与方案
七、研究方法
1、使用ELISA方法检测HSF-1、2、3、4基因和caspase-3、8、9,以及磷酸蛋白激酶的含量;
2、使用Western-blot检测Hsp90和蛋白激酶的表达含量;
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4. 研究创新点
十、特色或创新之处
本课题针对热应激反应,使用阿司匹林诱导热休克蛋白表达,提升热休克蛋白的表达效果,增强对心肌的保护作用,为动物养殖业预防热应激提供了用药参考。qPCR(realtimePCR)方法的应用已经成熟,能够直观地分析Hsp90的mRNA转录水平。
5. 研究计划与进展
十一、研究计划及预期进展
本试验将在2015年9月初开始,预计在2015年10月完成ELISA和Western-blot的试验,在2015年11月完成TUNEL和qPCR的实验。在2015年12月中旬完成实验的全部内容。
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