1. 研究目的
本研究旨在构建表达嗜热石油杆菌（Thermotogapetrophila）GH1β-葡萄糖苷酶的重组菌株，并对其进行诱导表达、纯化和酶学性质表征。
进而，利用该重组酶催化白藜芦醇苷转化为白藜芦醇，探究其转化效率和反应条件，为白藜芦醇的生物合成提供新的思路和方法。
4. 研究的方法与步骤
本研究将采用基因工程、微生物发酵、酶工程等技术手段，具体步骤如下：1.从嗜热石油杆菌基因组中扩增GH1β-葡萄糖苷酶基因，构建重组表达载体，转化大肠杆菌，筛选阳性克隆并进行测序验证。
2.对重组菌株进行诱导表达，通过SDS-PAGE和酶活测定，优化重组酶的表达条件，并利用亲和层析等方法对重组酶进行纯化。
3.对纯化的重组酶进行酶学性质研究，测定其最适pH、最适温度、热稳定性、底物特异性等，并与已报道的β-葡萄糖苷酶进行比较分析。
5. 研究的创新点
1.首次利用嗜热石油杆菌GH1β-葡萄糖苷酶催化白藜芦醇苷转化为白藜芦醇，探索一种新的白藜芦醇生物合成途径。
2.对嗜热石油杆菌GH1β-葡萄糖苷酶的酶学性质进行系统研究，为其在生物转化领域的应用提供理论依据。
3.优化白藜芦醇苷的生物转化条件，提高转化效率和产品纯度，为白藜芦醇的工业化生产提供参考。
6. 计划与进度安排
第一阶段 （2024.12~2024.1）确认选题，了解毕业论文的相关步骤。
第二阶段（2024.1~2024.2）查询阅读相关文献，列出提纲
第三阶段（2024.2~2024.3）查询资料，学习相关论文
7. 参考文献（20个中文5个英文）
[1] 刘晓梅,周庆,姜绍通,等.嗜热菌β-葡萄糖苷酶的酶学性质及其应用[J].食品与生物技术学报,2020,39(03):1-8.
[2] 王宇,王静,张兰,等.黑曲霉β-葡萄糖苷酶的基因克隆、表达及酶学性质研究[J].食品工业科技,2022,43(13):147-154.
[3] 陈晨,李静,张博润,等.响应面法优化米曲霉β-葡萄糖苷酶发酵条件的研究[J].食品工业科技,2021,42(17):153-159.
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