1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）
1 粘康酸简介 粘康酸（Muconic acid, MA)，又称己二烯二酸，具有广阔应用前景的C6平台化合物。
晶体为白色棱柱形，味酸，难溶于水，是大宗化学品己二酸和对苯二甲酸的直接前体。
粘康酸具有三种异构同分异构体，分别是顺，顺－粘康酸（Cis,cis-Mmuconic acid, ccMA)，顺，反－粘康酸（Cis,trans-Muconic acid)，和反，反－粘康酸 (Trans,trans-Muconic acid)o顺，顺－粘康酸是具共轭双键的脂肪二元羧酸，可以作为基础原料制备功能树脂、医药及农药，尼龙等，也是优良的紫外线吸收剂，主要用于紫外线防护剂及军工特种用品如隐形飞机涂层。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
本实验研究的主要内容：通过半理性设计提高邻苯二酚1，2－双加氧酶的催化活性，并对该重组酶的酶学性质进行分析测定。
研究方法一：重组质粒构建重组载体构建：实验中邻苯二酚1,2－双加氧酶的基因来源于节杆菌Arthrobacter sp. CGMCC 3584(Arcat)，根据设计的引物，以CatA编码基因为目的基因，利用PCR扩增技术对其位点进行突变，利用一步克隆法将CatA编码基因突变片段插入出发载体pET28a的Nde I和EcoR I酶切位点之间得到重组质粒pET28a-ArcatA。
研究方法二：重组菌构建及酶的获得将重组载体pET28a-ArcatA通过热击法转化至Escherichia coli BL21(DE3)中，即得重组菌。
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