转灰飞虱CYP6CS2v1,CYP439A1v3基因果蝇的生物测定开题报告

 2023-02-15 10:16:31

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

灰飞虱 Laodelphax striatellus ,属于半翅目、飞虱科、灰飞虱属,广泛分布于从菲律宾至西伯利亚的亚洲稻区和欧洲的温带地区[1]。

灰飞虱是一种寄主广泛、取食多样的昆虫,以取食小麦、大麦、水稻、玉米、谷子、高梁等多种禾本科植物为主[2]。

由于化学杀虫剂的长期、大量不合理施用、滥用,导致灰飞虱对多种杀虫剂产生了抗药性[3]。

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2. 研究的基本内容和问题

1. 研究的目标本实验前期通过显微注射,获得了转基因灰飞虱CYP6CS2v1、CYP439A1v3的果蝇。

本实验利用Gal4/UAS系统实现灰飞虱解毒酶基因CYP6CS2v1、CYP439A1v3的超量表达,并通过与对照品系相比,利用生物测定的方法,研究解毒酶基因与灰飞虱抗性的关系。

2. 研究的内容(1)转基因灰飞虱CYP6CS2v1、CYP439A1v3的果蝇的饲养;(2)利用Gal4/UAS系统,将上述转基因果蝇品系分别与tul-gal4果蝇杂交,获得超量表达灰飞虱CYP6CS2v1和CYP439A1v3基因的果蝇;(3)对超量表达靶基因的果蝇分别进行农药的生物测定,并以未转入目标基因的果蝇品系作为对照。

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3. 研究的方法与方案

1.研究方法:(1)果蝇的饲养果蝇饲料配方:800ml体系:玉米粉68g,白糖52g,琼脂6g,酵母粉18g,苯甲酸0.52g。

果蝇饲养条件:温度:25℃,湿度60%-70%,白天16小时黑暗8小时。

(2)杀虫剂毒力测定-点滴法以超量表达靶基因的果蝇品系为实验组,以未超量表达靶基因的果蝇为对照组。

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4. 研究创新点

通过简单易行的生物测定技术,比较超量表达灰飞虱P450基因的果蝇与对照品系之间死亡率的差异,明确灰飞虱P450基因在抗性形成中的作用,阐明该基因的功能。

5. 研究计划与进展

2016.9-2016.10查找并阅读相关文献,了解研究背景,掌握基础知识,确定实验方案。

2016.11 -2016.12对转基因果蝇品系和对照品系进行药剂生物测定。

2017.1-2017.4总结实验结果,撰写结题报告。

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