1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
疫霉菌隶属于卵菌，目前已鉴定到100余种，能侵染几乎所有双子叶植物，引起多种重要作物病害[1]。
其中最著名的当属引起爱尔兰大饥荒的致病疫霉菌(Phytophthora infestans)[2]和引起大豆根腐病的大豆疫霉菌（hytophthora sojae）[3]。
大豆疫霉可造成大豆生产30%以上甚至毁灭性的损失，它可以在大豆各个发育时期发病，每年造成全球约10至20亿美元的经济损失。
2. 研究的基本内容和问题
目标：本研究将首先对大豆疫霉的分泌蛋白家族进行生物信息学分析，通过聚类和筛选，鉴定出功能未知的分泌蛋白家族，结合这些基因在病原菌发育和侵染过程中的基因表达谱数据，确定特定的家族，对这些基因进行克隆，通过在烟草叶片中瞬时表达这些蛋白，分析他们是否在烟草叶片上诱导植物免疫（细胞死亡）、抑制激发子诱导的植物细胞死亡，或促进疫霉菌对烟草的侵染等。
该研究以期筛选出有生物学功能的新的大豆疫霉的分泌蛋白，进一步认识效应子干扰植物抗病性的机理，明确疫霉菌致病的方式途径以及作用在寄主植物的靶标位点，可以为有效的病害防控策略提供新的思路及方向，对设计和改造抗病性有重要意义。
内容：1、通过生物信息学对病原菌的分泌蛋白组进行家族聚类与分析；2、通过基因表达谱数据推测基因的功能从而筛选候选的功能基因；3、通过蛋白的瞬时表达技术高通量筛选有功能的病原菌效应子。
3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案利用现有的所有大豆疫霉6487的蛋白序列，通过OrthoMcl进行蛋白家族聚类，找到包含分泌蛋白的家族；在这些分泌蛋白中筛选蛋白功能未知的、基因成员在20个以上的家族，且目的蛋白可以在侵染过程中高表达。
最终确定研究的目标家族利用大豆疫霉cDNA序列和基因组序列进行基因克隆，构建植物表达载体，在烟草叶片中瞬时表达，通过注射烟草，观察是否在烟草叶片上诱导植物细胞死亡、抑制激发子诱导的植物细胞死亡，或促进疫霉菌对烟草的侵染；最后利用Western-Blot验证目的基因在烟草叶片上的蛋白表达情况。
可行性分析1、基于本实验室现有的大豆疫霉蛋白序列，利用生物信息学手段，可以很快得到目的分泌蛋白家族；2、实验室现有的对于大豆疫霉效应分子RxLR研究成果，其实验方法对本研究有所帮助。
4. 研究创新点
首次对于大豆疫霉蛋白中除RxLR、CRN、NLP和elicitin之外的分泌蛋白进行研究，分析其是否具有干扰植物免疫的功能。
5. 研究计划与进展
2016年9月 生物信息学分析；2016年10月2016年11月 构建载体，挑选阳性转化子；2016年12月2017年1月 注射本氏烟，统计烟草注射结果；2017年2月2017年4月试验数据整理数据及撰写论文。
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