1. 研究目的与意义
巴豆为大戟科植物巴豆CrotontigliumL.的干燥成熟种子，性热，味辛。归胃、大肠经。具有峻下逐水的功效。巴豆药用历史悠久，从古一直沿用至今，辛热有毒，为峻猛的泻下药，临床上均以治疗寒凝便秘、水肿胀满为主，其泻下逐水作用被广泛应用于临床。巴豆有大毒，《神农本草经》中将巴豆放在下品，《本草纲目》则把其列入毒草类，临床使用不当会对皮肤、口腔、消化道粘膜产生强烈刺激，可引起恶心、剧烈呕吐、腹痛、腹泻、便血等消化道刺激，还可对肾脏产生强烈刺激，引起血尿、血闭等肾毒性。国内外研究表明，巴豆的主要毒性成分被认为是巴豆油和巴豆蛋白，而这两种毒性成分均为巴豆的主要成分，其中巴豆油的含量约为40-60%，巴豆蛋白的含量约为18-20%，含量仅次于巴豆油。有研究发现，巴豆经加热炮制后提取的巴豆油致小鼠耳肿胀致炎作用强弱为：炒巴豆油>高压蒸巴豆油>生巴豆油，表明巴豆油加热后其毒性并未降低。指导老师课题组前期研究发现，巴豆总蛋白具有明显毒性，其小鼠腹腔注射LD50值为231.35mg/kg，灌胃LD50值为3064.2mg/kg。同时发现蒸制不同时间巴豆总蛋白的毒性大小为：生品组蒸制30min组蒸制60min组蒸制90min组蒸制120min组，表明加热能明显降低巴豆蛋白的毒性。故传统炮制方法中采用加热步骤的主要目的是降低巴豆蛋白的毒性。课题组前期研究发现，巴豆蛋白能引起巨噬细胞释放大量的炎症因子，具有强烈的致炎作用。因此，本论文主要以巴豆蛋白为研究对象，对巴豆蛋白诱导巨噬细胞释放炎症因子的细胞信号通路进行研究，从细胞分子水平的角度来阐明巴豆蛋白在致炎过程中的分子机制，旨在解决关于巴豆蛋白的毒性问题，将对巴豆的毒性研究、饮片大生产具有重要意义。
2. 文献综述
MARK信号通路在肠道炎症反应中的研究进展
摘 要：炎症性肠炎（inflammatory bowel diseasesIBD）的发展过程中，肠道组织损伤与炎症相关信号通丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase MAPK)相关.促分裂原活化蛋白激酶（MAPK)通路是一类存在于真核细胞中高度保守的信号转导模块,近年来深入研究发现其通过ERK1/2通路、JNK/SAPK通路、p38-MAPK通路、ERK3/ERK4和ERK5通路可参与调节炎症信号通路,对炎症因子TNF-ɑ、IL-1β、IL-6、IL-8 表达具有调控作用，且给予IBD患者通路抑制剂治疗可改善临床症状, 为IBD的治疗提供治疗方案。
3. 设计方案和技术路线
1研究方案：
（一）巴豆蛋白的提取：
1）购置四川宜宾道地药材巴豆。
4. 工作计划
1．2016年2月26日,与指导老师见面,拿到任务书.
2．2016年3月5日前,搜集论文资料,撰写开题报告,提交开题报告.
3．2016年3月~5月,做具体实验,整理数据,写作论文.
5. 难点与创新点
课题组前期研究结果表明，巴豆蛋白具有消化道毒性和肾毒性，而这些毒性作用均与炎症反应密切相关，因此，本论文以巴豆蛋白为研究对象，从细胞分子水平对巴豆蛋白的致炎作用进行研究，探索巴豆蛋白在致炎过程中对MAPK信号通路的影响，从而确定巴豆蛋白致炎的分子机制。
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