线粒体靶向性铜配合物通过SIRT3调控肝癌细胞自噬的机制研究开题报告

 2023-01-02 11:27:13

1. 研究目的与意义

探究药物影响肝癌细胞自噬调控的线粒体凋亡途径是否由SIRT3介导以及分子机制是否与AMPK有关,进行以下实验:

(1) 观察药物对肝癌细胞中SIRT3、AMPK、p-AMPK基因及蛋白表达的影响;

(2) 明确药物是否通过调控SIRT3进而影响自噬介导的肝癌细胞线粒体凋亡,进行以下实验:瞬时转染SIRT3 siRNA作用于HepG2细胞,检测药物对线粒体凋亡及自噬指标的影响,同时检测SIRT3、AMPK、p-AMPK的基因及蛋白表达。

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2. 文献综述

铜配合物抗肝癌的研究进展

047113350 李思绪13级生物制药3班

[摘 要]原发性肝细胞癌是全世界最常见恶性肿瘤之一,其死亡率在恶性肿瘤中位于胃癌、食道癌之后居第三位。铜是一种微量元素,它对于维持人体健康的一些生理活动起着非常重要的作用。自Reiness报道铜能对抗氨基甲酸乙酯(尿烷)实验性诱发皮肤腺癌的作用,众多科研工作者开始将铜及其铜配合物用于治疗癌症。本篇将重点讨论铜配合物通过SIRT3调控肝癌细胞自噬的机制研究。

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3. 设计方案和技术路线

探究药物影响肝癌细胞自噬调控的线粒体凋亡途径是否由SIRT3介导以及分子机制是否与AMPK有关,进行以下实验:

(1) 观察药物对肝癌细胞中SIRT3、AMPK、p-AMPK表达的影响:培养肝癌细胞,设空白组、CTB 3个剂量组(1、2、4μM),Real-time PCR、Western blot检测SIRT3、AMPK、p-AMPK的基因及蛋白表达;

(2) 明确药物是否通过调控SIRT3进而影响自噬介导的肝癌细胞线粒体凋亡,实验方案如下:

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4. 工作计划

1月至2月:查阅文献,收集资料2月至3月:撰写文献综述,开题报告3月至4月:设计实验,编写实验方案,进行课题实验,处理数据4月至5月:完成毕业论文写作,提交论文5月至6月:完成论文答辩

5. 难点与创新点

铜配合物作为一种潜在的人工核酸酶已在生物化学与分子生物学领域被广泛研究,大量结构设计新颖、核酸酶活性优良的铜配合物已在序列测定、分子印迹、异常识别与切割方面具有潜在的应用价值。由于铜配合物毒性低、氧化还原电位适中等原因致使其在抗肿瘤活性研究中也取得了显著进展,但是有关靶向性铜配合物的设计合成和对特定细胞器的作用研宄还比较少见。因此,具有靶向基团的铜配合物作为抗肿瘤药物的研宄正在逐步兴起。

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