1. 研究目的与意义
本实验针对国内中药材市场上珍贵稀有动物药材全蝎存在伪品现象,开展DNA条形码技术快速鉴别上述动物药材及其混伪品、近缘物种的技术研究。
通过对收集的动物中药样本全蝎COI序列进行测定,在Genbank库中进行Blast分析,构建NJ系统树,计算K2P(Kimura2 - parameter)遗传距离,探讨DNA条形码对东亚钳蝎中药及其混伪品的识别鉴定特性,研制DNA条形码检测技术,构建东亚钳蝎的基因条形码标准数据库,建立东亚钳蝎遗传资源的DNA条形码网络服务体系及基于DNA条形码技术的快速检测方法和分类平台。
实验的开展有利于我国珍稀动物中药材全蝎市场的规范化建设和贸易监管,具有良好的示范应用价值。
2. 文献综述
名贵中药全蝎DNA条形码技术研究文献综述
姓名 祁旻杰 班级 中药资源与开发 1201学号120205115
前言
3. 设计方案和技术路线
研究方案:
本次实验拟利用DNA条形码COI序列对全蝎及其混伪品进行鉴别研究,通过对样品标准序列进行测序,建立DNA条形码数据库,构建动物药材东亚钳蝎DNA条形码分子鉴定的标准平台,实现全蝎及其混伪品的标准化鉴定和信息数据共享,确保药材的质量及临床疗效。
技术路线:
东亚钳蝎 伪品
药材正品、混伪品收集 基原动物采集
序列PCR扩增与测定
4. 工作计划
2022年1月:收集样品,请专家鉴别各样品种类并进行细一步的归纳保存,自主了解现市场上全蝎主要产地、市场价格、市场混伪品情况,并仔细研读实验方案,为之后实验作充分准备。 2022年2月至2022年4月:依照实验方案提取样品DNA,接着进行PCR扩增,确保样品无误后,开始DNA测序。 2022年5月:对所得序列进行质量评价与拼接,分析序列,归纳总结DNA测序结果。整理结果2,构建东亚钳蝎DNA条形码分子鉴定数据库,完善数据信息。 |
5. 难点与创新点
特色:在此之前对于全蝎的鉴定具使用传统方法,此种鉴别方法不仅需要消耗大量时间精力,且对鉴别研究员经验有较高要求,因此中药全蝎真伪品鉴别难度颇大,从而导致药材市场中掺假掺伪现象严重,极大扰乱了市场秩序,甚至危害用药病人的生命健康。本次实验采用先进的DNA分子条形码研究技术,对中药材东亚钳蝎进行鉴别真伪,具有高效、快速、准确的特点,大幅度减轻东亚钳蝎真品掺假掺伪的混乱情况,使得全蝎用药更加安全有保障。
创新:
②创新适合的动物药材DNA提取方法
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