胶体金免疫层析法鉴定甘草酸的研究开题报告

 2023-01-01 10:45:24

1. 研究目的与意义

研究内容:1. 制备胶体金免疫层析试纸2. 以甘草提取物为原料进行免疫层析法检测,并验证该方法的合理性研究意义:甘草是中国传统补气类中药,其应用历史久远,使用范围广泛。

其来源于豆科植物甘草、胀果甘草、光果甘草的根及根茎。

性平,味甘,主入脾、心、肺、胃经,可补中益气,清热解毒,缓急止痛,调和诸药。

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2. 文献综述

胶体金免疫层析法原理及应用研究综述李挺(南京中医药大学翰林学院 药学系 江苏泰州120203243)【摘要】:胶体金免疫层析技术是以免疫学为基础的新型检测手段,该技术以抗体抗原的特异性免疫结合为核心理论,大多采用双抗夹心法或抗原竞争法的原理来检测抗原或抗体。

胶体金免疫层析技术的陈本相对较低,而且操作简单,检测速度快,检测的结果可靠,同时应用范围广泛。

目前胶体金检测技术已经普遍运用于妊娠检测,药物残留检测,细菌病毒检测等医学类检测和诊断领域。

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3. 设计方案和技术路线

甘草酸单克隆抗体的培养与制备→胶体金分散体系制备与检测→免疫层析试纸条的制备→试纸条的灵敏性、特异性检查→甘草酸检测专用试纸的应用

4. 工作计划

2022.1-2022.2获取以甘草酸合成人工抗原并培养单克隆抗体;制备粒径和均一度较好的胶体金2022.3-2022.4制作胶体金免疫试纸,并检测其与半抗原甘草酸的定性反应结果 2022.5-2022.6以不同浓度的甘草酸及对照品进行检测实验,并初步验证其检测限

5. 难点与创新点

目前针对甘草酸的定性鉴定方法主要是硫酸法和薄层色谱荧光检验法等,虽然结果都具备说服力,但是均有明显的缺点,比如对试剂和仪器设备的要求较高,实验结果等待较长等。

胶体金免疫层析法,主要利用免疫学抗原与抗体特异性结合的原理,利用胶体金标记抗体,以层析拦截的方式通过显色给出实验结果。

如若大批量培养和生产甘草酸的对应单克隆抗体,则可以制备较多的甘草酸专用检验试纸。

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