生/醋甘遂粉末给予前后正常动物肠道菌中短脂肪酸含量的比较研究开题报告

 2022-12-28 10:20:32

1. 研究目的与意义

内容:采用氯甲酸酯作为衍生试剂对短链脂肪酸进行衍生,再通过GC-MS 测试。

氯甲酸酯能与羧基反应,使游离脂肪酸等物质酯化,适用于本实验的研究。

该方法的优势在于:(1)反应速度快,1 min 能够完成;(2)衍生无需在高温条件下进行,避免了短链脂肪酸的挥发;(3)衍生可在水相中进行,适用于生物样品的处理;(4)衍生产物容易得到,无需分离出待测物质;(5)衍生试剂价格相对便宜。

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2. 文献综述

GC-MS技术在中药研究中的应用摘要:随着社会的进步,GC-MS在中药研究领域的应用变得十分广泛。

由于其分离效能好、灵敏度高,这种分析方法也越来越被重视。

其主要应用于化学成分研究,包括挥发油分析、生物碱分析、糖类分析等,还有中药指纹图谱和质量控制研究。

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3. 设计方案和技术路线

研究方案:取健康雄性SD 大鼠,按体重随机分为空白组,生粉组和醋粉组。

空白组给予同体积0.5%CMC-Na 溶液,开展下述研究:(1)样本采集 在给药第六天后收集新鲜粪便样品约1g,置于2mL 无菌的离心管中,-80℃保存备用。

(2)样品前处理取粪便样品约100 mg,精密称定,置2 mL离心管中,加入0.005 M的NaOH水溶液(含5.03g/mL的己酸-d3作为内标)1 mL。

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4. 工作计划

2022年1月2022年2月查阅文献,了解GC-MS技术的基本原理及其在中医药领域的应用,完成综述。

2022年3月2022年5月掌握样品的采集、样品前处理等过程,根据研究方案和技术路线进行相关实验。

2022年6月整理实验数据,撰写论文。

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5. 难点与创新点

作为毒性作用主要发生于胃肠道部位的中药,甘遂的毒性作用与人体肠道中重要共生微生物-肠道菌群的相关性尚缺乏系统研究,而短链脂肪酸作为经肠道菌群发酵的直接产物与甘遂的毒性关系有待研究。

采用分离效能好,灵敏度高的GC-MS技术,探寻与甘遂毒性相关的短链脂肪酸的含量变化,并比较醋炙前后的含量差异,为研究甘遂醋炙减毒的生物学作用和物质基础提供一定的依据。

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