1. 研究目的与意义
1.用参芪扶正注射液在低糖环境下干预小鼠脾脏CD4 细胞,用MTT法检测不同给药浓度CD4 细胞的增殖情况,并和正常对照组比较;2.荧光法检测低糖微环境下SFI对CD4 细胞摄取葡萄糖能力的影响;3.Western Blotting检测CD4 细胞糖酵解相关蛋白的表达4.结果分析,论证SFI是否对低糖环境下CD4 细胞糖酵解有影响,以及是否与直接影响糖酵解相关蛋白(GPD2、GAPDH、PEP和EZH2)的活性或水平有关。
因此,本研究是为了论证SFI对离体低糖微环境下CD4 T细胞糖代谢重编程的影响,对指导SFI临床用药有着十分重要的意义。
2. 文献综述
参芪扶正注射液的药理作用及研究进展摘 要:参芪扶正注射液是由党参、黄芪提取的纯中药注射剂。
党参健脾益气,补中气以资生化之源;黄芪为补气药之长,补气作用全面,既可以内补脏腑之气,又能益卫固表托毒。
参芪并用,具有较好的扶正功效。
3. 设计方案和技术路线
提取小鼠脾脏CD4 细胞并培养→MTT法检测低糖环境下CD4 细胞的增殖情况→荧光法检测低糖微环境下SFI对CD4 细胞摄取葡萄糖能力的影响→Western Blotting检测CD4 细胞糖酵解相关蛋白的表达
4. 工作计划
3.27-4.15:提取小鼠脾脏CD4 细胞并培养;4.16-4.20:MTT法检测低糖环境下CD4 细胞的增殖情况;4.21-4.25:荧光法检测低糖环境下SFI对CD4 细胞摄取葡萄糖能力的影响;4.26-5.2:Western Blotting检测CD4 细胞糖酵解相关蛋白的表达
5. 难点与创新点
未见有SFI对糖酵解的作用的研究,所以本研究创新在于,SFI调节肿瘤免疫的机制可能与促进TIL-T的糖酵解或直接影响糖代谢重编程相关效应分子的活性或水平有关。
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